北京(jing)恒(heng)奧(ao)德(de)儀(yi)器儀(yi)表(biao)有(you)限(xian)公司
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恒(heng)奧(ao)德(de)儀(yi)器紫外(wai)分(fen)析(xi)儀(yi)原(yuan)理及(ji)應(ying)用用途(tu)及適用(yong)範圍
原(yuan)理及(ji)應(ying)用
紫外(wai)分(fen)析(xi)儀(yi)是(shi)熒(ying)光術的應(ying)用,熒光術是(shi)什麽呢(ne)? 了(le)解下什麽(me)是(shi)熒光,熒(ying)光又(you)作(zuo)“螢光”,是(shi)種光致(zhi)發(fa)光的冷(leng)發(fa)光現(xian)象(xiang)。當(dang)某(mou)種常(chang)溫物質經(jing)某(mou)種波長(chang)的入射(she)光(通常(chang)是(shi)紫(zi)外(wai)線(xian)或(huo)X射(she)線(xian))照(zhao)射(she),吸(xi)收光能(neng)後(hou)入激發(fa)態(tai),並(bing)且(qie)立(li)即(ji)退激發(fa)並(bing)發(fa)出(chu)比入射(she)光的的波(bo)長長的出(chu)射(she)光(通常(chang)波(bo)長(chang)在可(ke)見(jian)光波(bo)段);而(er)且(qie)旦(dan)停止入射(she)光,發(fa)光現(xian)象(xiang)也(ye)隨之立(li)即(ji)消(xiao)失(shi)。具(ju)有(you)這(zhe)種性(xing)質(zhi)的出(chu)射(she)光就(jiu)被(bei)稱之(zhi)為熒(ying)光。 知(zhi)道(dao)了(le)什麽(me)是熒光,顧(gu)名(ming)思義(yi)就(jiu)能想(xiang)到(dao)什麽(me)是熒(ying)光術。熒(ying)光術是(shi)某(mou)些(xie)物質受(shou)定波(bo)長(chang)的光激(ji)發(fa)後(hou),在短(duan)時間(jian)內(10-8秒(miao))會發(fa)射(she)出(chu)波長(chang)大於激(ji)發(fa)波(bo)長(chang)的光,這(zhe)種光稱(cheng)為熒(ying)光。這(zhe)發(fa)光現(xian)象(xiang)在各方(fang)面(mian)的應(ying)用及有(you)關的方(fang)法(fa)稱(cheng)為熒(ying)光術(fluorescent technique)。
物質經(jing)過紫(zi)外(wai)線(xian)照(zhao)射(she)後(hou)發(fa)出(chu)熒(ying)光的現(xian)象(xiang)可(ke)分(fen)為兩種情(qing)況,是(shi)自發(fa)熒(ying)光,如葉綠素、血(xue)紅素等(deng)經(jing)紫外線(xian)照(zhao)射(she)後(hou),能發(fa)出(chu)紅色(se)的熒(ying)光,稱(cheng)為自發(fa)熒(ying)光;二種是誘(you)發(fa)熒(ying)光,即(ji)物體經(jing)熒光染(ran)料(liao)染色(se)後再(zai)通過紫(zi)外(wai)線(xian)照(zhao)射(she)發(fa)出(chu)熒(ying)光,稱(cheng)為誘(you)發(fa)熒(ying)光。
熒(ying)光術在生(sheng)物化(hua)學及(ji)分(fen)子(zi)生(sheng)物學研究中應(ying)用主要包(bao)括以(yi)下幾個(ge)方(fang)面:
1、物質的定(ding)性(xing):不同的熒(ying)光物質有(you)不同的激(ji)發(fa)光譜(pu)和發(fa)射(she)光譜(pu),因此可(ke)用(yong)熒光行物質的鑒別。與(yu)吸(xi)收光譜(pu)法(fa)相比,熒光法(fa)具(ju)有(you)更(geng)的選(xuan)擇性(xing)。
2、定(ding)量(liang)測(ce)定(ding):利(li)用在較(jiao)低濃度(du)下熒光強(qiang)度(du)與樣品濃度(du)成正比這(zhe)關系(xi)可(ke)以(yi)定量分(fen)析(xi)樣品(pin)中熒(ying)光組(zu)分(fen)的含量(liang),常(chang)用(yong)於(yu)測(ce)定(ding)氨(an)基(ji)酸(suan)、蛋(dan)白(bai)質、核酸(suan)的含量(liang)。熒(ying)光定(ding)量(liang)測(ce)定(ding)的個(ge)優點是靈(ling)敏度(du),例如維生(sheng)素(su)B2的測(ce)定(ding)*可(ke)達(da)1毫微(wei)克/毫升,這(zhe)優點使測(ce)定(ding)時所(suo)需要樣(yang)品量(liang)大大減少。 這(zhe)種定量(liang)測(ce)定(ding)方(fang)法(fa)還可(ke)應(ying)用於酶(mei)催化(hua)的反應(ying),只(zhi)要反應(ying)前後有(you)熒光強(qiang)度(du)的變(bian)化(hua),就(jiu)可(ke)用(yong)來測(ce)定(ding)酶(mei)的含量(liang)及(ji)酶(mei)反應(ying)的速率(lv)等(deng)。
3、研(yan)究生(sheng)物大分(fen)子(zi)的物理化(hua)學特性(xing)及(ji)其(qi)分(fen)子(zi)的結構和構象(xiang):熒(ying)光的激(ji)發(fa)光譜(pu)、發(fa)射(she)光譜(pu)、量子(zi)產(chan)率(lv)和(he)熒(ying)光壽(shou)命等(deng)參數不僅(jin)和(he)分(fen)子(zi)內(nei)熒光發(fa)色(se)基(ji)團的本身結構有(you)關,而(er)且(qie)還強(qiang)烈(lie)地依賴於發(fa)色(se)團周圍的環(huan)境,即(ji)對周圍環境(jing)十分(fen)敏感。利(li)用此特點可(ke)通過測(ce)定(ding)上述(shu)有(you)關熒(ying)光參數的變(bian)化(hua)來研(yan)究熒光發(fa)色(se)團所(suo)在位(wei)的微(wei)環(huan)境(jing)的特征及(ji)其(qi)變(bian)化(hua)。在此研(yan)究中,除了(le)利(li)用生(sheng)物大分(fen)子(zi)本身具(ju)有(you)的熒(ying)光發(fa)色(se)團(如色(se)氨(an)酸(suan)、酪氨(an)酸(suan)、鳥苷(gan)酸(suan)等(deng),此類熒光稱(cheng)為內(nei)源熒光)以(yi)外(wai),可(ke)將(jiang)些(xie)特殊的熒(ying)光染(ran)料(liao)分(fen)子(zi)共(gong)價地結合或吸(xi)附在生(sheng)物大分(fen)子(zi)的某(mou)位(wei),通過測(ce)定(ding)該染料(liao)分(fen)子(zi)的熒(ying)光特性(xing)變(bian)化(hua)來研(yan)究生(sheng)物大分(fen)子(zi),這(zhe)種染料(liao)分(fen)子(zi)被(bei)稱為“熒光探針”,它(ta)們(men)發(fa)出(chu)的熒(ying)光般(ban)稱(cheng)為外(wai)源熒光。熒(ying)光探針的應(ying)用,大大地開拓(tuo)了(le)熒光術在分(fen)子(zi)生(sheng)物學中的應(ying)用範圍。
4、利(li)用熒(ying)光壽(shou)命、量(liang)子(zi)產(chan)率(lv)等(deng)參數可(ke)以(yi)研究生(sheng)物大分(fen)子(zi)中(zhong)的能(neng)量轉(zhuan)移現(xian)象(xiang):通過該現(xian)象(xiang)的研(yan)究,可(ke)以(yi)獲得(de)生(sheng)物大分(fen)子(zi)內(nei)的許(xu)多(duo)信息。
三(san)用(yong)紫(zi)外分(fen)析(xi)儀(yi)用(yong)途(tu)及適用(yong)範圍
△ 在科(ke)學(xue)實驗作(zuo)中(zhong)它是(shi)檢(jian)測(ce)許(xu)多(duo)主(zhu)要物質如蛋(dan)白(bai)質、核苷(gan)酸(suan)等(deng)。
△ 在藥(yao)物生(sheng)產(chan)和(he)研(yan)究中,可(ke)用(yong)來檢(jian)查(zha)激(ji)素(su)生(sheng)物堿(jian),維生(sheng)素(su)等(deng)各種 能產(chan)生(sheng)螢(ying)光藥(yao)品(pin)的質(zhi)量,它特別適(shi)宜(yi)作薄(bo)層(ceng)分(fen)析(xi),紙(zhi)層(ceng)分(fen)析(xi)斑點和 檢(jian)測(ce)。
△ 在染(ran)料(liao)塗料(liao)橡膠(jiao)、石油(you)等(deng)化(hua)學行業(ye)中,測(ce)定(ding)各種螢光材料(liao),螢光示(shi)劑及添(tian)加劑, 鑒別不同種類的原(yuan)油(you)和(he)橡(xiang)膠(jiao)制品。
△ 在紡(fang)織(zhi)化(hua)學纖(xian)維中(zhong)可(ke)以(yi)用於測(ce)定(ding)不同種類的原(yuan)材料(liao)如羊(yang)毛(mao)、真(zhen)絲(si)人(ren)纖維、棉(mian)花(hua)合成纖(xian)維,並(bing)可(ke)檢(jian)查(zha)成(cheng)量(liang)。
△ 在糧(liang)油(you)、蔬(shu)菜(cai)、食品門可(ke)用(yong)於檢(jian)查(zha)毒素(su)、食品添(tian)加劑,變(bian)質(zhi)的蔬(shu)菜(cai)、水果(guo)、可(ke)可(ke)豆(dou)肪、巧(qiao)克力、脂肪(fang)、蜂(feng)蜜、糖、蛋(dan) 00等(deng)的質(zhi)量。
△ 在地質(zhi)、考古等(deng)門可(ke)起(qi)到(dao)發(fa)現(xian)各種礦物質、判別文(wen)物化(hua)石的真(zhen)偽(wei)。
