紫外分析(xi)儀是(shi)熒(ying)光(guang)術(shu)的應用(yong)，熒(ying)光(guang)術(shu)是(shi)什(shen)麽(me)呢(ne)? 了解下(xia)什(shen)麽(me)是(shi)熒(ying)光(guang)，熒光又作"螢光(guang)"，是種(zhong)光(guang)致(zhi)發光(guang)的冷發(fa)光(guang)現象(xiang)。當某種(zhong)常(chang)溫(wen)物(wu)質(zhi)經某種(zhong)波(bo)長的入射(she)光(通常是紫外線或(huo)X射線)照射(she)，吸收光(guang)能後入激(ji)發(fa)態，並(bing)且立(li)即(ji)退激(ji)發(fa)並(bing)發出(chu)比入(ru)射光的的波(bo)長長的出(chu)射光(guang)(通常波(bo)長在(zai)可(ke)見光波(bo)段);而(er)且旦(dan)停(ting)止(zhi)入(ru)射(she)光，發光現象(xiang)也(ye)隨(sui)之(zhi)立(li)即(ji)消失(shi)。具(ju)有這(zhe)種(zhong)性(xing)質(zhi)的出(chu)射光(guang)就(jiu)被(bei)稱(cheng)之(zhi)為熒光。 知道(dao)了什(shen)麽(me)是(shi)熒(ying)光(guang)，顧(gu)名思義就(jiu)能(neng)想(xiang)到什(shen)麽(me)是(shi)熒(ying)光(guang)術(shu)。熒(ying)光(guang)術(shu)是(shi)某(mou)些(xie)物(wu)質(zhi)受(shou)定(ding)波(bo)長的光激(ji)發(fa)後，在短時間(jian)內(nei)(10-8秒)會發(fa)射出(chu)波(bo)長大(da)於(yu)激(ji)發(fa)波(bo)長的光，這(zhe)種(zhong)光(guang)稱(cheng)為熒光。這(zhe)發(fa)光(guang)現象(xiang)在各方面的應用(yong)及有關(guan)的方法(fa)稱(cheng)為熒光術(shu)(fluorescent technique)。

物(wu)質(zhi)經過紫外線照(zhao)射(she)後發出(chu)熒光(guang)的現象(xiang)可(ke)分(fen)為兩(liang)種(zhong)情況，是自(zi)發熒(ying)光，如葉(ye)綠(lv)素、血(xue)紅素(su)等經(jing)紫外線照(zhao)射(she)後，能發出(chu)紅色的熒光(guang)，稱(cheng)為自(zi)發熒(ying)光;二種(zhong)是(shi)誘(you)發熒(ying)光，即物(wu)體(ti)經熒光染(ran)料(liao)染(ran)色後再(zai)通過紫外線照(zhao)射(she)發(fa)出(chu)熒光(guang)，稱(cheng)為誘(you)發熒(ying)光。

熒光(guang)術(shu)在(zai)生(sheng)物(wu)化(hua)學及分子(zi)生物(wu)學(xue)研究中應用(yong)主要(yao)包(bao)括以下幾個方面:

1、物(wu)質(zhi)的定性(xing):不同的熒光(guang)物(wu)質(zhi)有不同的激(ji)發(fa)光譜(pu)和發(fa)射光譜(pu)，因(yin)此可(ke)用(yong)熒(ying)光(guang)行(xing)物(wu)質(zhi)的鑒(jian)別(bie)。與吸收光(guang)譜法(fa)相比(bi)，熒(ying)光(guang)法(fa)具(ju)有更的選擇性(xing)。

2、定量(liang)測定(ding):利用(yong)在(zai)較低(di)濃度(du)下(xia)熒(ying)光強度與(yu)樣(yang)品(pin)濃度(du)成正(zheng)比(bi)這(zhe)關(guan)系可(ke)以定量分析(xi)樣品(pin)中熒(ying)光組分的含量(liang)，常用(yong)於(yu)測(ce)定(ding)氨(an)基酸、蛋(dan)白質、核(he)酸的含量(liang)。熒光定量測(ce)定的個優(you)點(dian)是(shi)靈敏(min)度，例(li)如維(wei)生(sheng)素(su)B2的測定(ding)*可(ke)達(da)1毫微(wei)克(ke)/毫升(sheng)，這(zhe)優(you)點(dian)使(shi)測定時所(suo)需(xu)要樣(yang)品(pin)量大(da)大減少。 這(zhe)種(zhong)定(ding)量(liang)測(ce)定(ding)方法(fa)還(hai)可(ke)應用(yong)於(yu)酶(mei)催化(hua)的反(fan)應，只(zhi)要反(fan)應前後有熒光強度(du)的變化(hua)，就(jiu)可(ke)用(yong)來(lai)測(ce)定(ding)酶(mei)的含量(liang)及酶(mei)反(fan)應的速率(lv)等。

3、研究生物(wu)大(da)分子(zi)的物(wu)理化學(xue)特性(xing)及其分子(zi)的結構(gou)和構(gou)象(xiang):熒光(guang)的激(ji)發(fa)光譜(pu)、發(fa)射光譜(pu)、量(liang)子(zi)產率和熒(ying)光壽命(ming)等(deng)參(can)數不僅(jin)和分(fen)子(zi)內熒光發色基團的本身(shen)結構(gou)有關(guan)，而(er)且還強(qiang)烈(lie)地(di)依賴於發色團周圍(wei)的環(huan)境，即(ji)對周圍(wei)環(huan)境十分敏(min)感。利用(yong)此特(te)點(dian)可(ke)通過測定(ding)上(shang)述(shu)有關(guan)熒光(guang)參數的變化(hua)來(lai)研究熒光(guang)發(fa)色團所在(zai)位的微環(huan)境的特征(zheng)及其變化。在(zai)此研究中，除(chu)了利用(yong)生(sheng)物(wu)大(da)分子(zi)本身具有的熒光(guang)發色團(如色氨(an)酸、酪氨(an)酸、鳥苷酸等，此類(lei)熒(ying)光稱(cheng)為內源熒(ying)光(guang))以外，可(ke)將(jiang)些特(te)殊的熒光(guang)染料(liao)分(fen)子(zi)共(gong)價地(di)結合(he)或(huo)吸附(fu)在生(sheng)物(wu)大(da)分子(zi)的某位，通過測定(ding)該(gai)染料(liao)分(fen)子(zi)的熒光(guang)特性(xing)變(bian)化(hua)來(lai)研究生物(wu)大(da)分子(zi)，這(zhe)種(zhong)染(ran)料(liao)分(fen)子(zi)被稱(cheng)為"熒光(guang)探針(zhen)"，它(ta)們(men)發出(chu)的熒光(guang)般稱(cheng)為外源熒(ying)光(guang)。熒光探(tan)針(zhen)的應用(yong)，大(da)大(da)地(di)開(kai)拓了熒光(guang)術(shu)在(zai)分(fen)子(zi)生物(wu)學(xue)中的應用(yong)範(fan)圍(wei)。

4、利用(yong)熒(ying)光(guang)壽(shou)命(ming)、量子(zi)產率等(deng)參(can)數可(ke)以研究生物(wu)大(da)分子(zi)中的能量(liang)轉(zhuan)移現象(xiang):通過該(gai)現象(xiang)的研究，可(ke)以獲得生(sheng)物(wu)大(da)分子(zi)內的許(xu)多信(xin)息(xi)。

以往人們常用(yong)熒(ying)光(guang)偏振做(zuo)標來(lai)研究生物(wu)大(da)分子(zi)動(dong)力(li)學(xue)。人們趨(qu)於(yu)用(yong)熒(ying)光(guang)偏振隨(sui)時間(jian)的衰減(jian)來(lai)研究這(zhe)些(xie)問(wen)題。在(zai)這(zhe)種(zhong)方法(fa)中(zhong)，激(ji)發(fa)光不(bu)是(shi)連續的面偏振光(guang)，而(er)是偏振的光脈沖，因(yin)此測(ce)得的F∥和F是在(zai)兩(liang)個不(bu)同方向上(shang)偏振的熒光(guang)隨(sui)時間(jian)的衰減(jian)，它(ta)既(ji)和熒(ying)光壽命(ming)τ有關(guan)，又與(yu)分子(zi)在溶(rong)液(ye)中(zhong)的運動(dong)有關(guan)，因此常(chang)表(biao)示為F∥(t)和F⊥(t)。由它(ta)們(men)可(ke)得相當重要(yao)的物(wu)理量--各向異(yi)性參(can)數A(t)。由A(t)可(ke)推測生物(wu)大(da)分子(zi)的形狀、分(fen)子(zi)轉(zhuan)動(dong)弛豫時間(jian)(即從(cong)個定(ding)向的狀態(tai)到個無(wu)定向狀態(tai)所要的時間(jian))，而(er)可(ke)以推知生物(wu)大(da)分子(zi)的大小(xiao)、分子(zi)在溶(rong)液(ye)中(zhong)的轉(zhuan)動(dong)角(jiao)度和時間(jian)之(zhi)間(jian)的函數關(guan)系。由這(zhe)些(xie)結(jie)果(guo)可(ke)以研究分子(zi)之(zhi)間(jian)的相互(hu)作用(yong)、分(fen)子(zi)間(jian)結(jie)合(he)的緊密程度(du)、蛋(dan)白質、核(he)酸分子(zi)的解聚(ju)程(cheng)度等(deng)等。

另外，熒光(guang)術(shu)在(zai)免(mian)疫學(xue)中亦(yi)有廣泛的應用(yong)。重(zhong)要(yao)的就(jiu)是(shi)熒(ying)光(guang)抗(kang)體法(fa)。將(jiang)某些熒光(guang)染(ran)料(liao)與(yu)血(xue)清抗(kang)體相結(jie)合(he)，這(zhe)種(zhong)標記的抗(kang)體仍(reng)可(ke)專地(di)與相應抗(kang)原發(fa)生(sheng)結合(he)，形成(cheng)的復合(he)體具(ju)有熒光特性(xing)，從(cong)而(er)可(ke)以確定(ding)抗(kang)原或(huo)抗(kang)體的存(cun)在及其含量(liang)。

利用(yong)熒(ying)光(guang)術(shu)設(she)計的紫外分析(xi)儀主要(yao)是(shi)物(wu)質(zhi)的定性(xing)方面的應用(yong)，包(bao)括:

⑴在科(ke)學實(shi)驗(yan)作中檢(jian)測，許(xu)多主要(yao)物(wu)質(zhi)如蛋(dan)白質、核(he)苷酸等。

⑵在藥(yao)物(wu)生(sheng)產和研究中，可(ke)用(yong)來(lai)檢(jian)查(zha)激(ji)素(su)生物(wu)堿(jian)，維(wei)生(sheng)素(su)等(deng)各種(zhong)能(neng);產生熒(ying)光(guang)藥(yao)量(liang)，特別(bie)適(shi)宜作薄(bo)層分析(xi)和紙層分析(xi)斑點(dian)和檢(jian)測。

⑶在染(ran)料(liao)塗(tu)料(liao)橡膠(jiao)、石(shi)油等(deng)化(hua)學行(xing)業(ye)中，測定各種(zhong)熒(ying)光(guang)材料(liao)，熒(ying)光(guang)示劑(ji)及添(tian)加(jia)劑(ji)，鑒(jian)別(bie)不同種(zhong)類(lei)的原油和橡膠(jiao)制(zhi)品(pin)。

⑷紡(fang)織(zhi)化(hua)學(xue)纖維(wei)中(zhong)可(ke)測(ce)定不(bu)同種(zhong)類(lei)的原材料(liao)。如羊(yang)毛(mao)，真絲(si)人纖維(wei)，棉(mian)花，合(he)成纖維(wei)，並(bing)可(ke)檢(jian)查(zha)成(cheng)量(liang)。

⑸在糧(liang)油，蔬(shu)菜，食品(pin)門，可(ke)用(yong)於(yu)檢(jian)查(zha)毒(du)素(su)，食品(pin)添(tian)加(jia)劑(ji)，變(bian)質(zhi)的蔬菜、水(shui)果(guo)、可(ke)可(ke)豆(dou)、巧克(ke)力(li)、脂肪、蜂(feng)蜜(mi)、糖(tang)蛋(dan)等(deng)的質量(liang)。

⑹在地(di)質、考古等(deng)門，可(ke)起(qi)到發(fa)現各種(zhong)礦(kuang)物(wu)質(zhi)，判(pan)別(bie)文物(wu)化(hua)石的真偽(wei)。

、測定(ding)密寫(xie)字跡(ji)等。