紫(zi)外(wai)分析儀的(de)原(yuan)理及(ji)其應用(yong)

紫外(wai)分析儀是(shi)熒光(guang)的(de)應(ying)用(yong)，熒光(guang)是(shi)什(shen)麽呢(ne)? 了解下(xia)什(shen)麽是(shi)熒光(guang)，熒(ying)光(guang)又(you)作(zuo)"螢光(guang)"，是(shi)種(zhong)光(guang)致(zhi)發(fa)光(guang)的(de)冷(leng)發(fa)光(guang)現象(xiang)。當某(mou)種(zhong)常(chang)溫(wen)物(wu)質(zhi)經某(mou)種(zhong)波(bo)長(chang)的(de)入射(she)光(guang)(通(tong)常(chang)是(shi)紫外(wai)線(xian)或(huo)X射(she)線)照(zhao)射(she)，吸收(shou)光(guang)能(neng)後(hou)入激(ji)發(fa)態，並(bing)且(qie)立即(ji)退(tui)激(ji)發(fa)並(bing)發(fa)出比入射(she)光(guang)的(de)的(de)波(bo)長(chang)長(chang)的(de)出射(she)光(guang)(通(tong)常(chang)波(bo)長(chang)在(zai)可(ke)見(jian)光(guang)波(bo)段);而(er)且旦(dan)停止入射(she)光(guang)，發(fa)光(guang)現象(xiang)也(ye)隨(sui)之立即消失。具有(you)這種(zhong)性(xing)質的(de)出射(she)光(guang)就(jiu)被(bei)稱之為熒光(guang)。 知(zhi)道(dao)了(le)什(shen)麽是(shi)熒光(guang)，顧(gu)名(ming)思(si)義(yi)就能(neng)想到(dao)什(shen)麽是(shi)熒光(guang)。熒(ying)光(guang)是(shi)某(mou)些物(wu)質受定波(bo)長(chang)的(de)光(guang)激(ji)發(fa)後(hou)，在(zai)短時(shi)間內(10-8秒)會發射(she)出波(bo)長(chang)大(da)於(yu)激(ji)發(fa)波(bo)長(chang)的(de)光(guang)，這(zhe)種(zhong)光(guang)稱為熒光(guang)。這(zhe)發(fa)光(guang)現象(xiang)在(zai)各(ge)方面的(de)應(ying)用(yong)及有(you)關的(de)方法(fa)稱為熒光(guang)(fluorescent technique)。

物(wu)質(zhi)經過紫(zi)外(wai)線(xian)照(zhao)射(she)後(hou)發出熒光(guang)的(de)現象(xiang)可(ke)分為兩種(zhong)情況(kuang)，種(zhong)是(shi)自發熒(ying)光(guang)，如(ru)葉(ye)綠(lv)素、血(xue)紅(hong)素等經紫外(wai)線(xian)照(zhao)射(she)後(hou)，能發(fa)出紅(hong)色的(de)熒(ying)光(guang)，稱為自發(fa)熒光(guang);二(er)種(zhong)是(shi)誘發熒(ying)光(guang)，即(ji)物(wu)體(ti)經熒光(guang)染(ran)料染(ran)色後(hou)再通(tong)過紫(zi)外(wai)線(xian)照(zhao)射(she)發出熒光(guang)，稱為誘發(fa)熒光(guang)。

熒(ying)光(guang)在(zai)生(sheng)物(wu)化(hua)學及分子生(sheng)物(wu)學研究(jiu)中(zhong)應(ying)用(yong)主(zhu)要包(bao)括以(yi)下幾(ji)個(ge)方面:

1、物質(zhi)的(de)定(ding)性(xing):不同(tong)的(de)熒(ying)光(guang)物(wu)質(zhi)有(you)不同(tong)的(de)激(ji)發(fa)光(guang)譜(pu)和發(fa)射(she)光(guang)譜(pu)，因此可(ke)用(yong)熒光(guang)行(xing)物(wu)質(zhi)的(de)鑒(jian)別。與吸(xi)收(shou)光(guang)譜(pu)法(fa)相比，熒(ying)光(guang)法(fa)具有(you)更的(de)選(xuan)擇性(xing)。

2、定量測定:利(li)用(yong)在(zai)較低(di)濃度(du)下熒光(guang)強度與樣品濃度(du)成正比這(zhe)關系可(ke)以(yi)定量分析樣品中(zhong)熒(ying)光(guang)組(zu)分的(de)含(han)量，常(chang)用(yong)於測定氨(an)基(ji)酸(suan)、蛋白質、核(he)酸(suan)的(de)含(han)量。熒(ying)光(guang)定(ding)量測定的(de)個(ge)優點(dian)是(shi)靈(ling)敏度，例如(ru)維生素B2的(de)測定*可(ke)達1毫(hao)微(wei)克/毫(hao)升(sheng)，這(zhe)優(you)點使(shi)測定時(shi)所需(xu)要樣品量大(da)大(da)減(jian)少。 這種(zhong)定(ding)量測定方法(fa)還(hai)可(ke)應(ying)用(yong)於酶(mei)催化(hua)的(de)反(fan)應(ying)，只(zhi)要反(fan)應(ying)前(qian)後(hou)有熒(ying)光(guang)強度的(de)變化(hua)，就可(ke)用(yong)來(lai)測定酶(mei)的(de)含(han)量及(ji)酶(mei)反(fan)應(ying)的(de)速(su)率(lv)等。

3、研(yan)究(jiu)生物(wu)大(da)分子的(de)物(wu)理化(hua)學性(xing)及其分子的(de)結(jie)構(gou)和構(gou)象:熒(ying)光(guang)的(de)激(ji)發(fa)光(guang)譜(pu)、發射(she)光(guang)譜(pu)、量子(zi)產率(lv)和熒(ying)光(guang)壽(shou)命等參(can)數不僅(jin)和分子內熒(ying)光(guang)發(fa)色基(ji)團的(de)本(ben)身(shen)結(jie)構(gou)有關，而(er)且還(hai)強烈地依(yi)賴(lai)於(yu)發色團周圍的(de)環境，即對(dui)周(zhou)圍(wei)環境十分敏感。利(li)用(yong)此點(dian)可(ke)通(tong)過測定上(shang)述(shu)有關熒光(guang)參(can)數(shu)的(de)變化(hua)來(lai)研究(jiu)熒光(guang)發(fa)色團所在(zai)位的(de)微(wei)環境的(de)征(zheng)及其變化(hua)。在(zai)此(ci)研(yan)究(jiu)中(zhong)，除(chu)了(le)利(li)用(yong)生物(wu)大(da)分子本(ben)身(shen)具(ju)有(you)的(de)熒(ying)光(guang)發(fa)色團(如色氨(an)酸、酪(lao)氨(an)酸、鳥苷(gan)酸等，此(ci)類熒光(guang)稱為內源(yuan)熒(ying)光(guang))以(yi)外(wai)，可(ke)將些殊(shu)的(de)熒(ying)光(guang)染(ran)料分子共(gong)價(jia)地結合(he)或吸附(fu)在(zai)生(sheng)物(wu)大(da)分子的(de)某(mou)位，通過測定該(gai)染(ran)料分子的(de)熒(ying)光(guang)性(xing)變化(hua)來(lai)研究(jiu)生物(wu)大(da)分子，這(zhe)種(zhong)染(ran)料分子被(bei)稱為"熒光(guang)探(tan)針(zhen)"，它們發出的(de)熒(ying)光(guang)般稱為外(wai)源(yuan)熒(ying)光(guang)。熒(ying)光(guang)探(tan)針(zhen)的(de)應(ying)用(yong)，大(da)大(da)地開拓了(le)熒(ying)光(guang)在(zai)分子生(sheng)物(wu)學中(zhong)的(de)應(ying)用(yong)範(fan)圍。

4、利(li)用(yong)熒光(guang)壽(shou)命、量子(zi)產率(lv)等參(can)數可(ke)以(yi)研究(jiu)生物(wu)大(da)分子中(zhong)的(de)能(neng)量轉(zhuan)移(yi)現象(xiang):通過該(gai)現象(xiang)的(de)研(yan)究(jiu)，可(ke)以(yi)獲得(de)生(sheng)物(wu)大(da)分子內的(de)許(xu)多信息(xi)。

以(yi)往人們常(chang)用(yong)熒光(guang)偏(pian)振(zhen)做(zuo)標(biao)來(lai)研究(jiu)生物(wu)大(da)分子動(dong)力(li)學。人們趨於用(yong)熒光(guang)偏(pian)振(zhen)隨(sui)時(shi)間的(de)衰(shuai)減(jian)來(lai)研究(jiu)這些(xie)問(wen)題(ti)。在(zai)這(zhe)種(zhong)方法(fa)中(zhong)，激(ji)發(fa)光(guang)不(bu)是(shi)連續的(de)面(mian)偏振(zhen)光(guang)，而(er)是(shi)偏振的(de)光(guang)脈(mai)沖(chong)，因(yin)此(ci)測得的(de)F∥和F是(shi)在(zai)兩(liang)個(ge)不(bu)同(tong)方向(xiang)上偏振的(de)熒(ying)光(guang)隨(sui)時(shi)間的(de)衰(shuai)減(jian)，它既(ji)和熒(ying)光(guang)壽(shou)命τ有關，又與分子在(zai)溶(rong)液(ye)中(zhong)的(de)運動有關，因此常(chang)表(biao)示(shi)為F∥(t)和F⊥(t)。由(you)它們可(ke)得(de)相當(dang)重(zhong)要的(de)物(wu)理量--各(ge)向(xiang)異性(xing)參數(shu)A(t)。由(you)A(t)可(ke)推測生物(wu)大(da)分子的(de)形(xing)狀、分子轉(zhuan)動(dong)弛豫(yu)時(shi)間(即(ji)從(cong)個(ge)定向(xiang)的(de)狀(zhuang)態到(dao)個無定向(xiang)狀態所要的(de)時(shi)間)，而(er)可(ke)以(yi)推知生(sheng)物(wu)大(da)分子的(de)大(da)小、分子在(zai)溶(rong)液(ye)中(zhong)的(de)轉(zhuan)動角(jiao)度和時(shi)間之間的(de)函數關系。由(you)這(zhe)些(xie)結(jie)果可(ke)以(yi)研究(jiu)分子之間的(de)相互作(zuo)用(yong)、分子間結(jie)合的(de)緊(jin)密程(cheng)度、蛋白質、核(he)酸(suan)分子的(de)解聚程度等等。

另(ling)外(wai)，熒(ying)光(guang)在(zai)免(mian)疫(yi)學中(zhong)亦(yi)有(you)廣泛的(de)應(ying)用(yong)。重要的(de)就(jiu)是(shi)熒光(guang)抗(kang)體法(fa)。將某(mou)些熒(ying)光(guang)染(ran)料與血(xue)清(qing)抗(kang)體相結(jie)合(he)，這種(zhong)標(biao)記(ji)的(de)抗(kang)體仍可(ke)地與相應(ying)抗(kang)原發生結合，形(xing)成(cheng)的(de)復(fu)合體(ti)具有(you)熒(ying)光(guang)性(xing)，從(cong)而(er)可(ke)以(yi)確定(ding)抗(kang)原或抗(kang)體的(de)存(cun)在(zai)及(ji)其含(han)量。

利(li)用(yong)熒光(guang)的(de)紫(zi)外(wai)分析儀主(zhu)要是(shi)物質的(de)定(ding)性(xing)方面的(de)應(ying)用(yong)，包(bao)括:

⑴在(zai)實(shi)驗(yan)作(zuo)中(zhong)檢測，許(xu)多主(zhu)要物(wu)質(zhi)如蛋白質、核(he)苷(gan)酸等。

⑵在(zai)藥物和研(yan)究(jiu)中(zhong)，可(ke)用(yong)來(lai)檢查激(ji)素生物(wu)堿(jian)，維生素等各(ge)種(zhong)能(neng);產生熒光(guang)藥量，別適(shi)宜作(zuo)薄(bo)層分析和紙(zhi)層分析斑點(dian)和檢測。

⑶在(zai)染(ran)料塗(tu)料(liao)橡(xiang)膠(jiao)、石油等化(hua)學行業中(zhong)，測定各(ge)種(zhong)熒(ying)光(guang)材(cai)料(liao)，熒(ying)光(guang)示(shi)劑(ji)及添(tian)加(jia)劑(ji)，鑒別不同(tong)種(zhong)類的(de)原(yuan)油和橡(xiang)膠(jiao)制(zhi)品。

⑷紡織化(hua)學纖維中(zhong)可(ke)測定不(bu)同(tong)種(zhong)類的(de)原(yuan)材(cai)料(liao)。如(ru)羊(yang)毛(mao)，真絲(si)人纖維，棉(mian)花，合(he)成(cheng)纖維，並(bing)可(ke)檢查成量。

⑸在(zai)糧油，蔬(shu)菜(cai)，食(shi)品(pin)，可(ke)用(yong)於檢查毒(du)素(如黃(huang)曲(qu)黴(mei)素等)，食(shi)品(pin)添加(jia)劑(ji)，變質(zhi)的(de)蔬(shu)菜(cai)、水(shui)果(guo)、可(ke)可(ke)豆、巧克力、脂(zhi)肪、蜂(feng)蜜、糖蛋等的(de)質(zhi)量。

⑹在(zai)地質、考古(gu)等，可(ke)起到發現各(ge)種(zhong)礦物質(zhi)，判別文物化(hua)石的(de)真(zhen)偽。

⑺在(zai)可(ke)檢查紋、測定密(mi)寫(xie)字跡等。

三用(yong)紫外(wai)分析儀用(yong)途及(ji)適(shi)用(yong)範(fan)圍

△ 在(zai)實(shi)驗(yan)作(zuo)中(zhong)它是(shi)檢測許(xu)多主(zhu)要物(wu)質(zhi)如蛋白質、核(he)苷(gan)酸等。

△ 在(zai)藥物和研(yan)究(jiu)中(zhong)，可(ke)用(yong)來(lai)檢查激(ji)素生物(wu)堿(jian)，維生素等各(ge)種(zhong) 能(neng)產生螢光(guang)藥品的(de)質(zhi)量，它別適(shi)宜作(zuo)薄(bo)層分析，紙層分析斑點(dian)和 檢測。

△ 在(zai)染(ran)料塗(tu)料(liao)橡(xiang)膠(jiao)、石油等化(hua)學行業中(zhong)，測定各(ge)種(zhong)螢光(guang)材(cai)料(liao)，螢光(guang)示(shi)劑(ji)及添(tian)加(jia)劑(ji)， 鑒別不同(tong)種(zhong)類的(de)原(yuan)油和橡(xiang)膠(jiao)制(zhi)品。

△ 在(zai)紡(fang)織化(hua)學纖維中(zhong)可(ke)以(yi)用(yong)於測定不(bu)同(tong)種(zhong)類的(de)原(yuan)材(cai)料(liao)如(ru)羊(yang)毛(mao)、真絲(si)人纖維、棉(mian)花合(he)成(cheng)纖維，並(bing)可(ke)檢查成量。

△ 在(zai)糧油、蔬(shu)菜(cai)、食(shi)品(pin)可(ke)用(yong)於檢查毒(du)素、(如黃(huang)曲(qu)黴(mei)素等)食(shi)品(pin)添加(jia)劑(ji)，變質(zhi)的(de)蔬(shu)菜(cai)、水(shui)果(guo)、可(ke)可(ke)豆肪、巧克(ke)力(li)、脂(zhi)肪、蜂(feng)蜜、糖、蛋 00等的(de)質(zhi)量。

△ 在(zai)地質、考古(gu)等可(ke)起到發現各(ge)種(zhong)礦物質(zhi)、判別文物化(hua)石的(de)真(zhen)偽。

△ 在(zai)門(men)可(ke)檢查痕測定、密(mi)寫(xie)字跡等。

折疊(die)三用(yong)紫外(wai)分析儀產品點及優(you)勢(shi)

1、紫(zi)外(wai)分析儀(YLN-II型(xing))由(you)紫(zi)外(wai)線(xian)燈(deng)管(guan)及(ji)濾(lv)光(guang)片(pian)組(zu)成。UVC 254nm波(bo)長(chang)， UVA 365nm波(bo)長(chang)， 兩種(zhong)波(bo)長(chang)可(ke)想互立使(shi)用(yong)，並(bing)具(ju)有點(dian)樣能。

2、紫(zi)外(wai)分析儀(YLN-II型(xing))具有(you)消(xiao)耗率(lv)小，熱量低(di)，可(ke)以(yi)長(chang)時(shi)間連(lian)續使(shi)用(yong)，大(da)的(de)優(you)點是(shi)可(ke)以(yi)隨(sui)開隨(sui)關開即可(ke)使(shi)用(yong)，十分方便(bian)。

3、紫外(wai)分析儀(YLN-II型(xing))紫外(wai)燈(deng)燈(deng)管(guan)發(fa)出的(de)光(guang)經濾(lv)光(guang)片(pian)濾(lv)去(qu)可(ke)見(jian)光(guang)，從(cong)而(er)為熒光(guang)分析提供(gong)了(le)強烈的(de)254nm和365nm紫(zi)外(wai)光(guang)。

4、在(zai)暗(an)室(shi)裏(li)，可(ke)以(yi)通過儀(yi)器(qi)的(de)點(dian)樣能，粗(cu)略(lve)估(gu)計樣品之間的(de)距(ju)離。

折疊(die)三用(yong)紫外(wai)分析儀標(biao)

△ 電(dian)源:220V,50HZ.

△ 率(lv):25 W.

△ 紫(zi)外(wai)線(xian)波(bo)長(chang):254nm、365nm.

△ 外(wai)形(xing)尺寸(cun):270×270×300mm.

△ 濾(lv)色片:200×50mm

△ 重量:約(yue)3 Kg

三用(yong)紫外(wai)分析儀作(zuo)原理(li)

采(cai)用(yong)不同(tong)波(bo)長(chang)的(de)紫(zi)外(wai)光(guang)對(dui)DNA、RNA電(dian)泳凝膠樣品行(xing)觀(guan)察(cha)拍照、檢測蛋白質、核(he)甘(gan)酸(suan)、，適(shi)用(yong)於核(he)酸(suan)電(dian)泳分析、檢測，PCR產物檢測，DNA紋圖(tu)譜(pu)分析，紙層分析或薄(bo)層分析等。適(shi)用(yong)於核(he)酸(suan)電(dian)泳、熒(ying)光(guang)的(de)分析、檢測， PCR 產物檢測， DNA 紋圖(tu)譜(pu)分析，是(shi)開展 RFLP 研(yan)究(jiu)， RAPD 產物分析的(de)理(li)想儀(yi)器。本(ben)機(ji)在(zai)暗(an)室(shi)操(cao)作(zuo)，便(bian)可(ke)對(dui)電(dian)泳凝膠行(xing)紫(zi)外(wai)觀(guan)察(cha)和照(zhao)相，也(ye)可(ke)配備蛋白檢測儀對(dui)蛋白行觀察(cha)和照(zhao)相。紫(zi)外(wai)強而(er)均勻(yun)。可(ke)接(jie)反(fan)射(she)燈(deng)等。此(ci)產品多次(ci)出口。

三用(yong)紫外(wai)分析儀的(de)使(shi)用(yong)方法(fa):該儀(yi)器設置三個開關鍵，分別控制(zhi)點樣燈(deng)，254nm和365nm紫(zi)外(wai)燈(deng)，且(qie)相互立，當需要某(mou)燈(deng)作(zuo)時(shi)，按下(xia)相應(ying)開關鍵即可(ke)。